La famiglia dei difeldidi è la più primitiva; vive in America centrale meridionale. Occupano soprattutto le zone tropicali; questi animali hanno cinque dita per zampa, il marsupio con apertura superiore o inferiore (opossum acquatico), dentatura carnivora, muso affilato e coda lunga con facoltà prensili, le femmine hanno mammelle sempre dispari. Sono attivi di notte è tendono a vivere soprattutto sugli alberi anche perché sul terreno sono piuttosto lenti; durante il giorno dormono nascosti nelle cavità degli alberi. Se attaccati da un predatore fingono la morte; la loro pelle emana un odore sgradevole. Si nutrono di insetti, carne, radici e frutte. La femmina ha una gestazione che dura solamente tre settimane e alla fine di queste partoriscono fino a 18 cuccioli che si nascondono subito dentro il marsupio. Nel caso esso manchi i piccoli si nascondono nelle cavità degli alberi. Questa famiglia comprende 12 generi e 37 specie con svariate sottospecie. Una tra le più note è l'opossum della virginia che vive in Canada e nelle foreste sudafricane; è grande al in circa 80 cm, a una pelliccia rossiccia. La coda è ricoperta solo alla base dai peli mentre per il resto è squamosa. Anche esso è un animale notturno, durante il giorno se ne sta nascosto sugli alberi; è un abile arrampicatore e utilizza al meglio la coda prensile. È onnivoro e tendenzialmente solitario, si Ciba di uccelli, uova, frutta e piccoli mammiferi. Nelle zone più settentrionali durante l'inverno resta inattivo. La femmina partorisce vari piccoli dopo una gestazione di 13 giorni; non tutti piccoli sopravvivono e quelli che resistono restano attaccati ai capezzoli della madre per circa tre mesi. Anche dopo restano comunque addosso la mamma che li trasporta dovunque va. La marmosa comune misura circa 21 cm ed è diffuso in Argentina. Ha un mantello color grigio rossastro sulla parte superiore e bianco nella parte inferiore; la coda è prensile e nuda, è un animale arboricolo ed è attivo soltanto la notte. Non possiede il marsupio; se è in pericolo lotta furiosamente ed emette un odore sgradevole. La lutreolina vive vicino all'acqua delle paludi dei fiumi e dei laghi ma la si può trovare anche nelle pianure del sud America. È simile alla lontra in quanto ha un corpo affusolato con arti brevi. Ha un capo corto un mantello color rossiccio; la coda è ricoperta di peli e non è prensile, anch'essa è priva di marsupio.si muove agilmente sul terreno anche se è una buona arrampicatrice. L'opossum acquatico è lungo circa 65 cm e vive in Messico e in Sudamerica. Ha un dorso nero e grigio e la parte inferiore bianca, la coda e parzialmente pelosa ed è nera alla base e bianca all'apice. Ha una pelliccia folta, il marsupio impermeabile ed un corpo affusolato con zampe palmate che gli permettono di stare in acqua senza problemi. Si nutre di crostacei, pesci.